Hamiyawati Qoimatu Dini Alfaruqi, 1611201002 and Wiwit Probowati, 8704181504271 and Nosa Septiana Anindita, S.Pt.,M.Biotech and ARIF Bimantara, S.Pi., M.Biotech (2020) SKRINING GEN Glukosiltransferase (gtf) PADA PROBIOTIK POTENSIAL ASAL AIR SUSU IBU (ASI). Skripsi thesis, Universitas ‘Aisyiyah Yogyakarta.

Abstract

Gen gtf merupakan gen penyandi enzim glukosiltransferase yang berperan dalam biosintesis eksopolisakarida (EPS) pada bakteri probiotik. EPS yang diproduksi berhubungan dengan kemampuan adhesi bakteri pada mukosa usus. Kemampuan ini merupakan salah satu karakteristik yang harus dimiliki probiotik potensial. Oleh karena itu, keberadaan gen gtf ini dapat dijadikan sebagai salah satu parameter dalam seleksi kandidat probiotik potensial melalui pendekatan molekuler. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui adanya gen gtf pada kandidat probiotik asal ASI. Metode pada penelitian ini meliputi: (1) reculture isolat probiotik, (2) isolasi DNA, (3) amplifikasi gen 16S rRNA menggunakan primer universal (pA dan pB), (4) amplifikasi primer spesifik BAL (LABfw dan LABrv), (5) desain primer spesifik untuk gen gtf dan (6) amplifikasi gen gtf. Isolat probiotik asal ASI diperoleh dari penelitian terdahulu dan dipilih 16 isolat berdasarkan kriteria probiotik terbaik melalui pengujian in vitro. Enam belas isolat probiotik asal ASI mampu tumbuh dengan baik pada media MRSB yang telah disuplementasi dengan bile salt 0,15%. DNA genom yang diisolasi dari 16 isolat probiotik diisolasi menggunakan FavorPrepTM Tissue Genomic DNA Extraction Mini Kit. Proses amplifikasi dilakukan dengan teknik PCR melalui beberapa tahap amplifikasi. Hasil amplifikasi gen 16S rRNA menggunakan primer universal (pA dan pB) diperoleh amplikon berukuran antara 500-1.000 bp. Adapun amplifikasi gen 16S rRNA menggunakan primer spesifik BAL (LABfw dan LABrv) diperoleh amplikon berukuran sekitar 700 bp pada seluruh isolat. Hasil amplifikasi gen gtf menggunakan primer spesifik melalui desain primer menghasilkan amplikon berukuran sekitar 325 bp pada seluruh isolat. Hasil penelitian menunjukkan bahwa 16 isolat probiotik asal ASI terbukti memiliki gen gtf

Actions (login required)

View Item

Downloads